疏水层析,又称疏水作用下层析(Hydrophobic Interaction Chromatography, HIC),是一种基于蛋白质疏水差异的吸附层析技术。它通过固定相上的疏水性配基与流动相中的疏水分子形成可逆性结合来实现对生物大分子的分离。
原理及特点
疏水层析的原理在于蛋白质表面通常含有疏水性和亲水性基团。当处于高盐溶液环境中时,蛋白质会与其表面的疏水性配基相互作用并结合。这种结合可以通过逐步降低盐浓度的方式进行洗脱,从而达到纯化的目的。疏水层析的特点在于其能够分离其他方法难以纯化的蛋白质,尤其是在高盐条件下,蛋白质与疏水配基之间的结合力更强。
影响因素
疏水层析的影响因素包括盐浓度、温度、pH值、表面活性剂和有机溶剂等。这些因素的变化会影响蛋白质与疏水配基间的结合力,进而影响分离效果。
应用
疏水层析常作为离子交换层析的一种补充手段,适用于分离那些在离子交换层析中难以或无法分离的物质。
参考资料
疏水层析基础知识.百家号.2024-11-25
第09章 疏水层析.人人文库.2024-11-25
第8章 疏水层析 - 百度文库.百度文库.2024-11-25